漆酶（Laccase）試劑盒說明書

分光光度法 50 管/24 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

漆酶（CE1.10.3.2）是一種含銅的多酚氧化酶，屬于銅藍氧化酶家族，廣泛分布于真菌和高等植物中，

具有較強的氧化還原能力，在紙漿生物漂白，環境污染物降解和木質纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應用。

測定原理：

漆酶分解底物ABTS 產生ABTS 自由基，在 420nm 處的吸光系數遠大于底物ABTS，測定 ABTS 自由基的增加速率，可計算得漆酶活性。

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組成：

工作液：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 25ml 試劑一溶解；用不完的試劑 4℃保存一周。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

需自備儀器和用品：

天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 ml 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

酶液提取：

1、組織：按照組織質量（g）：提取液體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml

提取液），進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心 30min，取上清，置冰上待測。

2、細胞：按照細胞數量（104 個）：提取液體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細胞加入

1ml 提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時間 3min）；然后 4℃，10000g

離心 10min，取上清置于冰上待測。

3、培養液：直接檢測。

測定步驟：

60℃水浴 20min 后冷卻至室溫，取上清液測定 420nm 處吸光值A，△A=A 測定管-A 對照管。

注意事項

1、極少數樣本在 60℃水浴 20min 后會出現沉淀，可經過 8000g 25℃離心 10min 后，取上清檢測，例如成熟的水稻葉片樣本。

2、為確保檢測準確性，若ΔA 大于 2，將樣本用提取液稀釋 2~10 倍后重新檢測，計算公式乘以相應稀釋倍數。

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