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諾博萊德 RNase-Free DNase Set II
DNase I 快速 DNA 消化試劑盒
DNaseI快速DNA消化試劑盒 RNA提取配套產品
目錄號：91415
產品內容
產品成份 | 保存 | 250 次 （91415-250） | 1000 次 （91415-1000） |
DNase I（1U/μl） | -20℃ | 0.25 ml | 1 ml |
10×DNase Buffer | -20℃ | 0.25 ml | 1 ml |
具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準
產品簡介
DNase I，即Deoxyribonuclease I，中文名稱為脫氧核糖核酸meiI，是一種可以消化單鏈或雙鏈DNA產生單脫氧核苷酸或單鏈或雙鏈的寡脫氧核苷酸的核酸內切mei。DNase I水解單鏈或雙鏈DNA后的產物，5'端為磷酸基團，3'端為羥基。DNase I活性依賴于鈣離子，并能被鎂離子或二價錳離子激活。鎂離子存在條件下，DNase I可隨機剪切雙鏈DNA的任意位點；二價錳離子存在條件下，DNase I可在同一位點剪切DNA雙鏈，形成平末端，或1-2個核苷酸突出的粘末端。
產品特點
本產品使用本公司te有的DNase和du特的反應液消化后不需要繁瑣的苯fen/lv仿抽提滅活；也不需要在加熱滅活前加入EDTA，避免了在RNA中引入EDTA抑制下游的反轉錄反應，使用起來非常快速，方便。
適用范圍
制備不含DNA的RNA樣品； RT-PCR反應前RNA樣品中去除基因組DNA等可能的DNA污染； 體外T7, T3, SP6等RNAPolymerases催化的RNA轉錄后去除DNA模板；DNase I footprinting研究DNA-蛋白質相互作用；缺口平移(nick translatioin)；產生DNA隨機片斷文庫；細胞凋亡TUNEL檢測中部分剪切基因組DNA作為陽性對照。
注意事項：
每 1μg RNA使用1 unit DNase I。如果RNA少于1μg，使用1 unit DNase I。如果使用RNA大于1μg，需要根據RNA的處理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer使用量和反應體積。
操作步驟
1. 在 RNAse free 管里面加入以下成分。
RNA | 1 μg (<8μl) |
10×DNase Buffer | 1 μl |
DNase I | 1 μl |
RNAse free water | Up to 10 μl |
2. 37℃孵育 30 分鐘。
3. 65℃孵育 10 分鐘，滅活 DNase I。
4. 取適量或者全部 10μl 的處理過的 RNA 直接用于 RT、RT-qPCR。
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