植物可溶性糖含量試劑盒說明書

微量法 100 管/96 樣

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

糖類物質是構成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質。可溶性糖是指樣品中的還原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。

測定原理：

蒽酮比色法。可用于可溶性單糖、寡糖和多糖的含量測定，具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優點。

植物可溶性糖含量試劑盒 氨基酸系列

組成：

自備儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、沸水浴、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、濃硫酸（不允許快遞）研缽、和蒸餾水。

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

樣品中可溶性糖的提取：

稱取 0.1~0.2g 樣本，加入 1ml 蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中，95℃水浴 10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心 10min，取上清液于 10ml 試管中，用蒸餾水定容至 10ml，搖勻備用。

測定步驟：

1、分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 620nm，蒸餾水調零。

2、調節水浴鍋至 95 度。

3、工作液的配制：在試劑一中加入 2.5ml 試劑二。充分溶解后使用，如較難溶解，可加熱攪拌；用不完的試劑 4℃保存一周；

4、加樣表（在EP 管中反應）：

混勻，置 95 度水浴中 10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后，取 200 μl 轉移至微量石英比色皿或 96 孔板中，于 620nm 處，分別讀取空白管和測定管吸光值，ΔA=A 測定管-A 空白管。

注意：1、空白管只要做一管。

2、如果ΔA 大于 1，需要將樣本用蒸餾水稀釋，計算公式中乘以相應稀釋倍數。

3、由于濃硫酸具有強腐蝕性，請謹慎操作。

可溶性糖含量計算：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1、標準條件下測定的回歸方程為 y = 8.55x - 0.07；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值。

2、按樣本鮮重計算：

可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷（W×V1÷V2）=1.17×(ΔA＋0.07) ÷W。

3、按樣本蛋白濃度計算：

可溶性糖（mg /mg prot）=[ (ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。

V1：加入樣本體積，0.04ml；V2：加入提取液體積，10ml； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

1、標準條件下測定的回歸方程為 y = 4.275x - 0.07；x 為標準品濃度（mg/ml），y 為吸光值。

2、按樣本鮮重計算：

可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷（W×V1÷V2）=2.34×(ΔA＋0.07) ÷W。

3、按樣本蛋白濃度計算：

可溶性糖（mg /mg prot）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷(V1×Cpr)=0.234×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。

V1：加入樣本體積，0.04ml；V2：加入提取液體積，10ml； Cpr：樣本蛋白質濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g。

注意：zui低檢測限為 1mg/g 鮮重或 10ng/ mg prot

植物可溶性糖含量試劑盒 氨基酸系列